产品目录

本试剂盒包括Basic Buffer Mix和Bst4.0/UDG Enzymes双组分，其中Basic Buffer Mix包含了反应缓冲液、Mg²⁺、dNTPs(含dUTP，不含dTTP)、冻干赋形剂，酶混合物包含Bst4.0 DNA/RNA聚合酶、热敏UDG。得益于Bst 4.0识别dUTP底物，反应底物中不包含dTTP，因此扩增产物均为dUTP产物，在配合热敏UDG的情况下，实现防污染性能。在实际测试中，含有10⁵ Copies的污染物的条件下，完全抑制污染扩增。

• Basic Buffer Mix中不含染料，可自行添加SYBR Green、Eva Green等染料进行荧光检测。
  
• 本试剂适用于开盖检测如核酸试纸条检测。
  
• 试剂中含有冻干赋形剂，试剂可直接冻干，无需再优化冻干配方。

• 本试剂防污染原理为：热敏UDG消化去除含有dUTP的扩增产物，热敏UDG在随后50℃以上迅速失活，并不影响后续LAMP扩增。因此，本试剂无法去除采用dTTP扩增的污染物，也不能消化天然的核酸底物（DNA/RNA）。为避免扩增气溶胶污染，实验室应长期使用本试剂进行实验，一旦使用dTTP试剂扩增后，造成实验室污染，采用本试剂不会消除假阳性扩增。
  
• 本试剂适用基于OTG染料变色法、SYBR Green法、基于Biotin/FAM探针的核酸胶体金法。但是本试剂不支持HNB、pH显色法。其它使用策略自行优化调整。

• 配制LAMP反应体系
  

  成分	用量
  2.5×Basic Buffer Mix	10μL
  25×Bst4.0/UDG Enzyme	1μL
  10×LAMP Primer Mix	2.5μL
  模板DNA/RNA	X μL
  ddH2O	至25μL

  • 10×LAMP Primer Mix浓度：FIP/BIP 16μM each、LoopF/B 4～8μM each、F3/B3 2μM each。
• 反应体系配好后，室温（25～37℃）放置2min，以消化去除潜在的核酸污染，随后置于65℃进行反应15～30min。